内源性血管生成抑制因子Arresten基因原核表达条件的优化

• 作者: 唐海英 解军 郑金平 陈显久
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Arresten 原核细胞 基因表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 52-55,60
• 分类号: R73-3|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 优化内源性血管生成抑制因子Arresten基因的原核表达条件.方法 从健康产妇的胎盘组织中提取总RNA,RT-PCR扩增Arresten基凶,构建重组表达质粒pBV220-Arr,分别转化感受态E. coli JM109、DH5α、BL21、BL21(DE3),诱导表达,SDS-PAGE分析表达产物,筛选出最优表达菌种,并对其菌体培养温度和时间、诱导温度和时间及溶解氧量进行优化.结果 重组表达质粒pBV220-Arr经酶切及测序证明构建正确,重组表达质粒在E. coli JM109、DH5α、BL21、BL21(DE3)4种菌中诱导2和4 h.均能表达出Arresten蛋白,诱导表达4 h,E .coli BL21(DE3)目的 蛋白表达量最高,湿菌重也明显大于其他菌种.E. coli BL21(DE3)/pBV220-Arr的最佳表达条件为:在500 ml培养瓶中加入100 ml LB氨苄阳性培养基,菌体于30℃培养4 h后,再42℃诱导表达4 h.结论 优化了Arresten基因工程菌的表达条件,为重组Arresten蛋白的大量表达提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈显久	山西医科大学生化和分子生物学教研室	117	434	11.0	16.0
2	解军	山西医科大学生化和分子生物学教研室	142	537	11.0	15.0
3	郑金平	山西医科大学卫生毒理学教研室	68	390	11.0	15.0
4	唐海英	山西医科大学卫生营养与食品卫生学教研室	11	75	5.0	8.0