人高迁移率族蛋白B1,高迁移率族蛋白B1Abox和Bbox的原核表达、纯化及高迁移率族蛋白B1多克隆抗血清的制备

• 作者: 任向荣 周红颜 苏绍波
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: HMGB1:A Box B Box 蛋白表达纯化 多克隆抗血清
• 年，卷（期）: 2011,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4005-4009
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:获取重组人高迁移率族蛋白B1 (HMGBl),HMGBl A box和B box的纯化蛋白,制备HMGBl的多克隆抗血清.方法:采用PCR方法扩增人HMGB1,HMGB1的Abox和B box目的基因片段,构建原核表达载体,进行原核表达与蛋白纯化,然后用HMGB1免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗血清.采用ELISA检测抗血清效价,用免疫组化检测HMGB1在小鼠肝损伤组织中的表达.结果:成功构建了人HMGB1,HMGB1的Abox和B box原核表达载体pET28-HMGB1、pET28-Abox、pET28-Bbox,在E.coli BL21中表达,镍亲和层析柱提纯,获取纯净目的蛋白.HMGB1免疫新西兰大白兔后,抗血清效价为1∶2,000,000,具有高度特异性.免疫组化显示小鼠坏死肝组织HMGB1表达增加.结论:本研究获得了人HMGB1以及HMGB1的A box和B box的纯化蛋白,制备了人HMGB1的多克隆抗血清,为HMGB1的结构、组织表达谱及其功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周红颜	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	10	58	4.0	7.0
2	苏绍波	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	3	1	1.0	1.0
3	任向荣	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0