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摘要:
将人可溶性晚期糖基化终产物受体(human soluble Receptor for advanced glycation end product,hsRAGE)cDNA插入巴斯德毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA,构建重组表达栽体pGAPZαA-hsRAGE,并转化到毕赤酵母X-33中,利用含抗生素Zeocin的YPD平板筛选重组子.重组菌株在甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAP)启动子的调控作用下,进行组成型分泌表达,在发酵液中获得了相对分子质量约45 kD的重组蛋白.摇瓶发酵结果表明,在发酵温度30℃、pH6.0、发酵时间72 h时重组蛋白表达占发酵上清液总蛋白68.4%.Western blotting显示,重组蛋白能够被相应抗体所识别.纯化后的重组hsRAGE具有与AGEs相互结合的活性,并能够显著地抑制AGEs诱导的人血管内皮细胞系ECV-304细胞NF-κB信号通路中NF-κB/p65基因的表达.
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文献信息
篇名 人可溶性晚期糖基化终产物受体的酵母表达及其生物活性分析
来源期刊 生物技术通报 学科 生物学
关键词 hsRAGE 毕赤酵母 组成型表达 纯化 信号通路 生物活性
年,卷(期) 2011,(1) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 170-173,178
页数 分类号 Q94
字数 2665字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 郑青 暨南大学药学院 67 505 12.0 19.0
2 张璟 暨南大学药学院 13 271 6.0 13.0
3 苏志坚 暨南大学生命与健康工程研究院 51 273 8.0 14.0
4 徐单单 暨南大学药学院 4 1 1.0 1.0
5 杨鹏辉 暨南大学药学院 3 0 0.0 0.0
6 莫桂玲 暨南大学药学院 3 6 1.0 2.0
7 张庆友 暨南大学药学院 2 0 0.0 0.0
8 张波 暨南大学药学院 4 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
hsRAGE
毕赤酵母
组成型表达
纯化
信号通路
生物活性
研究起点
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1985
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