苹果花粉中与花柱S-RNase互作的γ-硫堇筛选及鉴定

• 作者: 孙会玲 孟冬 李天忠 白松龄 胡建芳
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苹果 S-RNase 自交不亲和 花粉cDNA文库 酵母双杂交 γ-硫堇
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 果树
• 页码范围: 1437-1446
• 分类号: S661.1
• 字数: 3301字
• 语种: 中文

摘要

以‘国光’苹果（S1S2）花粉为材料,成功构建了酵母pGADT7-cDNA文库,转化效率约为1.2×106.μg-1,插入片段大小在300~2000bp之间。通过酵母双杂交方法,用苹果S2-RNase的C2HVC3区筛选文库获得一个长505bp的cDNA片段,经分析发现该cDNA序列上有一个261bp的开放阅读框（ORF）,该ORF编码一个具N端信号肽的多肽,该成熟多肽由64个氨基酸组成,富含带正电荷的赖氨酸和精氨酸,其C端有8个半胱氨酸和一个γ-硫堇功能域,结构预测显示其具有一个α螺旋,3个β折叠,4个二硫键,由此,推断其为苹果γ-硫堇,命名为MdD1。RT-PCR分析发现：MdD1基因在‘国光’苹果叶片、萼片、花瓣、子房、花药和花柱等组织中都有表达,但花药中表达量最高。酵母双杂交结果表明MdD1除了与苹果S2-RNase的C2HVC3区互作外,还与S1-RNase的C2HVC3区,S1、S2-RNase的成熟多肽区存在互作。初步认为：苹果γ-硫堇可能通过与S-RNase非特异性互作,作为花粉非S因子参与自交不亲和反应。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李天忠	中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室	60	973	18.0	28.0
2	胡建芳	中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室	39	323	11.0	15.0
3	孟冬	中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室	8	56	4.0	7.0
4	白松龄	中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室	5	47	4.0	5.0
5	孙会玲	中国农业大学农学与生物技术学院果树细胞与分子育种实验室	1	4	1.0	1.0