重组人抗血栓蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达及纯化

• 作者: 华子春 孙小强 杨翔 陈强 颜法宝 龚志飞
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗血栓蛋白 优化培养 发酵 纯化 鉴定
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 192-198
• 分类号: Q51
• 字数: 4633字
• 语种: 中文

摘要

旨在优化重组人抗血栓蛋白(rHAP)工程菌的自诱导培养基,以提高菌体产量及可溶性的重组rHAP蛋白含量.选取蛋白胨、酵母提取物、甘油、葡萄糖为因素,各取4个水平,采用正交表L16(45)进行试验设计,时影响菌体生长和可溶性rHAP表达水平的乳糖浓度进行了优化.结果表明自诱导培养基碳氮源的最优配比:2％蛋白胨,1.5％酵母,0.5％甘油,0.03％葡萄糖,0.2％乳糖.此时表达菌密度OD600和可溶性rHAP目标蛋白表达量分别是未优化前的2.04倍和2.85倍.在20 L发酵表达时,rHAP工程菌OD600值高迭93,菌体温量为1 620 g/20L.利用Q-Sepharose和SP-Sepharose纯化,Western blotting结果表明表达蛋白为目的融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈强	南京大学常州高新技术研究院	86	670	13.0	23.0
2	华子春	南京大学常州高新技术研究院	125	473	11.0	17.0
3	孙小强	常州大学石油化工学院	71	175	7.0	10.0
4	龚志飞	常州大学石油化工学院	1	5	1.0	1.0
13	杨翔		1	5	1.0	1.0
17	颜法宝		1	5	1.0	1.0