PTEN siRNA对多发性骨髓瘤细胞周期和侵袭力的影响及其分子机制

• 作者: 李杰 李燕 杨洁 潘峻 王瑞仓 王素云 王超 袁军 都洪岭
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多发性骨髓瘤 PTEN基因 干扰RNA RPMI8226细胞系
• 年，卷（期）: 2011,（24）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 4872-4875
• 分类号: R733.3
• 字数: 3965字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2011.24.058

摘要

目的 探讨PTEN基因对RPMI8226细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响及其分子作用机制.方法 应用PTEN siRNA转染RPMI8226细胞,封闭内源性PTEN mRNA表达.MTT法检测细胞生长曲线；流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡；Transwell小室实验检测细胞侵袭活性；荧光定量PCR(FQ-PCR)检测mRNA水平变化,Western印迹检测蛋白水平变化.结果 PTEN siRNA能明显抑制RPMI8226细胞PTEN mRNA及蛋白表达.MTT结果显示,转染后4d,与NS-siRNA组相比,PTEN-siRNA组细胞生存率为(141.55±8.34)％(P＜0.01).细胞周期分析显示PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞48 h后,与未转染细胞相比,处于G0/G1期细胞比例升高,G2/M期和S期细胞比例降低,凋亡峰显示凋亡的细胞比例减少.PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞后24h,未转染组、NS-siRNA转染组和PTEN-siRNA转染组黏附于下室面的细胞数量分别为:49.33±7.63、47.17 ±7.76和79.50±11.89,NS-siRNA和PTEN-siRNA组相比,差异显著(P＜0.01).转染PTEN siRNA后凋亡相关基因Survivin mRNA及蛋白表达水平增加,Caspase-3/-7 mRNA及蛋白活性表达水平减低.FAK mRNA MMP-2,MMP-9 mRNA p-FAK蛋白表达水平升高.结论 转染PTEN siRNA能够促进RPMI8226细胞增殖及侵袭能力,抑制细胞凋亡.