甘蓝SRK的S域及SCR酵母表达载体的构建及其相互作用区段的研究

• 作者: 任雪松 吴志刚 彭一波 朱利泉 李成琼 杨昆 杨红 王小佳 罗兵 薛丽琰 高启国 黄丹
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 甘蓝 SRK eSRKs基因 SCRs基因 pGADT7载体 pGBKT7载体 酵母双杂交体系
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 蔬菜
• 页码范围: 1479-1488
• 分类号: S635
• 字数: 1251字
• 语种: 中文

摘要

为了深入研究S位点受体激酶（SRK）和S位点富含半胱氨酸蛋白（SCR）甘蓝自交不亲和（self-incompatibility,SI）信号传导的雌雄决定因子的相互作用机制,以自交不亲和性高的结球甘蓝为材料,采用酵母双杂交体系,构建pGADT7-eSRKs和pGBKT7-SCRs重组载体,并分别转化到Y187和Y2HGold酵母中,通过SD/-Ade-His-Trp-Leu平板上菌落的形成,PCR以及x-α-gal显色反应鉴定转化到酵母中的两个重组质粒相互作用。结果表明,SRK S域的SRK1及SRK4分别与SCR2相互作用,且初步显示其相互作用区域为SRK第1个外显子的第16~421bp的片段和SCR第1876~2068bp的片段。这既为SRK-SCR相互作用提供了具体证据,也为甘蓝自交不亲和性分子机理的深入研究提供了新内容。