淫羊藿苷对人成骨细胞增殖及OPG蛋白表达的实验研究

• 作者: 徐宇 王翔 詹红生 赵咏芳 郭海玲
• 来源期刊: 中国骨伤
• 学科: 医学
• 关键词: 淫羊藿苷 成骨细胞 骨保护素
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 585-588
• 分类号: R274.91
• 字数: 3905字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0034.2011.07.015

摘要

目的:建立体外培养人成骨细胞系,观察淫羊藿苷对人成骨细胞增殖的影响,以及对人成骨细胞内骨保护素(Osteoprorotegerin,OPG)蛋白表达的影响,探讨淫羊藿苷促进人成骨细胞骨形成的可能作用机制.方法:将手术中取得的人股骨头松质骨骨片,使用酶消化法进行培养,取生长良好的第3代人成骨细胞进行实验.实验分为4组,对照组给予15%NCS-DMEM-F12(1:1)培养液培养;淫羊藿苷组分别于正常培养液内添加终浓度为10-6、10-8、10-10mol/L淫羊藿苷.噻唑蓝比色法(MTT)分别在培养1、3、5、7、9 d后观察各组人成骨细胞的增殖情况,用蛋白免疫印迹方法(in-cell western blot)测定各组培养8、10、12 d后人成骨细胞内OPG蛋白的表达情况.采用重复测量的方差分析方法,比较各组间在不同时间点的作用差异.结果:MTT结果,淫羊藿苷组具有促进人成骨细胞增殖的作用,并呈明显的量效关系,即随着淫羊藿苷浓度的增高,其促人成骨细胞增殖的能力增强,以10-6mol/L淫羊藿苷组(0.402±0.033)促成骨细胞增殖的作用最显著,与对照组(0.268±0.031)比较差异有统计学意义(P＜0.05).在时效关系的研究中,随着培养天数的延长,人成骨细胞的量逐渐增加,人成骨细胞于第5天时进入快速生长期,第7天进入平台期;淫羊藿苷组从第5天开始促进人成骨细胞的增殖,第7、9天仍然具有明显的促成骨细胞增殖的作用,以第9天促增殖作用最强.其中,第9天10-6mol/L淫羊藿苷组(0.402±0.033)与对照组(0.268±0.031)比较有统计学意义(P＜0.01).OPG表达结果,对照组人成骨细胞培养至第8天时检测到OPG蛋白的表达,表达量为1.01±0.08,第12天达到表达高峰为1.80±0.10,两个值比较有统计学差异(P＜0.05);在观察的不同天数内,不同浓度的淫羊藿苷组人成骨细胞内OPG蛋白表达低于对照组,且随着淫羊藿苷浓度的降低,OPG蛋白的表达量逐渐降低,差异有统计学意义(P＜0.05);干预12d,10-6mol/L淫羊藿苷组OPG量(1.67±0.13)和10-8mol/L淫羊藿苷组OPG量(1.64±0.05)比较,无统计学差异(P＞0.05).结论:淫羊藿苷促人成骨细胞骨形成能力的作用途径之一,是通过提高人成骨细胞的增殖能力而实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐宇	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科	42	837	17.0	28.0
2	詹红生	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科	217	2142	25.0	37.0
3	赵咏芳	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科	56	568	13.0	23.0
4	王翔	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科	46	667	14.0	25.0
5	郭海玲	上海中医药大学附属曙光医院石氏伤科	24	151	7.0	12.0