白花丹醌增强TRAIL诱导Kasumi-1细胞凋亡及其机制

• 作者: 刘立根 徐同鹏 蒋雪玮 谢英华 赵莉敏 陆道培 韩曦瑶 高武
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Kasumi-1细胞 细胞凋亡 白花丹醌 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 基因,DR5 基因,DR4
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 481-487
• 分类号: R363
• 字数: 5385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.03.012

摘要

目的:观察白花丹醌、rsTRAIL单独及其联合体外诱导Kasumi-1细胞凋亡的作用,探讨其作用机制.方法:采用WST-8 (CCK-8)比色法测定rsTRAIL、白花丹醌单独和联合应用对Kasumi-1细胞的生长抑制率;用流式细胞术、TUNEL法观察并且检测凋亡率;实时定量PCR检测白花丹醌作用后DR4和DR5 mRNA水平变化;Western blotting法检测单独应用及联合应用后DR5、caspase-3、caspase-8、caspase-9、Bid、Bax及c-FLIP的变化.结果:(1)白花丹醌和rsTRAIL单独应用均可抑制Kasumi-1细胞的生长,联合应用可增加对Kasumi-1细胞的生长抑制率且呈时间和剂量依赖性(P＜0.05).(2)rsTRAIL(100 μg/L)和白花丹醌(2 μmol/L)单用及其联合使用诱导Kasumi-1细胞Annexin V阳性细胞百分率分别为(27.7±2.9)%、(25.6±3.1)%和(52.1±3.3)%.(3)TUNEL法检测发现联合应用组较单用组凋亡细胞显著增多.(4)实时定量PCR检测发现白花丹醌可以上调DR5的表达.(5)Western blotting发现白花丹醌单独作用及其联合rsTRAIL应用时上调DR5、激活caspase-8和下调c-FLIP表达.结论:白花丹醌具有增强TRAIL诱导Kasumi-1细胞凋亡的作用,其机制与DR5上调、caspase-8激活和c-FLIP下调有关.