TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞基质金属蛋白酶2及其抑制剂表达

• 作者: 刘桂香 牟丽丽 王玲 韩明磊 高岩
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 转染 豚鼠巩膜成纤维细胞 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶2特异性组织抑制剂
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1016-1020,1024
• 页数: 6页
• 分类号: R772.3
• 字数: 6462字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察转染基质金属蛋白酶2抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase2,TIMP-2)基因的豚鼠巩膜成纤维细胞不同时间增生能力及基质金属蛋白酶2( matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和TIMP-2的表达,探讨基因治疗近视的可行性.方法 随机选取三色健康豚鼠,组织块法体外培养原代巩膜成纤维细胞,免疫组织化学法进行波形蛋白的鉴定,取第3～6代细胞进行实验.分子克隆构建携带TIMP-2基因的真核表达载体,转染豚鼠巩膜成纤维细胞,MTT法观察转染后12 h、24h、48 h、3d、5d、7d细胞增生能力.提取总RNA,二步法逆转录-聚合酶链反应检测MMP-2 mRNA及TIMP-2 mRNA的表达水平.结果 豚鼠巩膜成纤维细胞原代、传代培养生长良好,波形蛋白鉴定阳性.转染3d、5d、7 dTIMP-2基因转染组成纤维细胞的增生速度分别为0.672 4±0.009 2、0.796 3±0.0060、0.8462±0.0064,明显快于正常对照组成纤维细胞(0.581 0±0.012 0、0.652 5±0.0072、0.712 9 +0.013 2),差异均具有显著统计学意义(均为P＜0.01).转染48 h MMP-2 mRNA表达即开始减少,转染3d时表达明显减少,达到最低,除转染12h与24h之间外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间MMP-2 mRNA表达差异均有统计学意义(均为P＜0.05).TIMP-2 mRNA表达在转染48 h时即开始增加,除12h与24h外,转染组与正常对照组、各转染不同时间组间TIMP-2 mRNA表达差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论转染TIMP-2基因对豚鼠巩膜成纤维细胞有促增生作用,TIMP-2基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞抑制MMP-2 mRNA的表达,可在一定程度上阻止近视发展中巩膜组织的丢失与重塑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩明磊	青岛大学医学院附属医院眼科	4	23	3.0	4.0
2	刘桂香	青岛大学医学院附属医院眼科	67	244	8.0	12.0
3	高岩	青岛大学医学院附属医院眼科	12	39	5.0	6.0
4	王玲	青岛大学医学院附属医院眼科	56	211	8.0	11.0
5	牟丽丽	高密市人民医院眼科	1	6	1.0	1.0