黑曲霉β-甘露聚糖酶基因manA在PK15细胞中的分泌表达

• 作者: 刘德武 吴珍芳 张茂 林纯 蔡更元 许惠 贺晓燕 邹娴
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑曲霉 β-甘露聚糖酶 重叠延伸PCR PK15细胞
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 192-197
• 分类号: Q786
• 字数: 4492字
• 语种: 中文

摘要

通过RT-PCR方法,从黑曲霉总RNA中克隆出β-甘露聚糖酶基因manA的成熟肤编码序列.将其与猪腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)基因的信号肤序列通过重叠延伸PCR方法得到拼接片段,并插入到真核表达载体pcDNA6.0/HisTMA中,得到重组质粒pcDNA-PSmanA.重组质粒经过PCR、酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且读码框完全正确.在脂质体介导下将pcDNA-PSmanA转染猪肾(PK15)细胞进行分泌表达,通过RT-PCR方法证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中检测酶活性得到β-甘露聚糖酶基因酶活性为14.5 IU/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘德武	华南农业大学动物科学学院	79	381	11.0	17.0
2	吴珍芳	华南农业大学动物科学学院	56	312	9.0	15.0
3	许惠	华南农业大学动物科学学院	5	5	2.0	2.0
4	蔡更元	广东省农业科学院畜牧研究所	17	50	4.0	6.0
5	张茂	华南农业大学动物科学学院	2	3	1.0	1.0
7	林纯	华南农业大学动物科学学院	3	5	2.0	2.0
8	贺晓燕	华南农业大学动物科学学院	2	3	1.0	1.0
11	邹娴	华南农业大学动物科学学院	3	4	2.0	2.0