pH值敏感相分离特性的蛋白质酶解试剂研究

• 作者: 吴蓓蓓 商云岭 邬建敏
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: pH值敏感高分子 胰蛋白酶 偶联 酶活性 肽谱分析
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-16
• 分类号: O6
• 字数: 4072字
• 语种: 中文

摘要

通过DEC/NHS偶联反应将胰蛋白酶(Trypsin)连接到具有pH值敏感性的壳聚糖(CS)链上.Trypsin-CS偶联物保留了CS的pH值敏感相分离特性及Trypsjn的酶催化活性.浊度滴定实验表明,此偶联物的临界相分离pH值(CPSP)仍保持在偏中性范围内,并且随CS的分子量降低而略有上升.这种偏中性的CPSP值有利于相分离循环过程中保持酶的催化活性.分子量为8×104的CS与Trypsin的偶联物在存放30 d后可保留69%的初始酶活性.偶联物经过6次循环使用后的残余活性为初始活性的79%.Trypsin-cs偶联物可在低于CPSP值的条件下对蛋白质进行均相酶解,并在高于CPSP值时从催化体系中分离出来.HPLC肽谱分析表明,Trypsin-CS偶联物中Trypsin的自降解被显著抑制,因而有效消除了Trypsin自降解肽段对肽谱分析的干扰.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬建敏	浙江大学化学系微分析系统研究所	23	299	9.0	17.0
2	吴蓓蓓	浙江大学化学系微分析系统研究所	9	57	4.0	7.0
3	商云岭	浙江大学化学系微分析系统研究所	2	2	1.0	1.0