不同冷冻方法对水牛体外生产胚胎冷冻效果的研究

• 作者: 庞春英 张秀芳 李日聪 杨春艳 杨炳壮 梁贤威 覃广胜 郑海英 黄健 黄芬香
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 工学
• 关键词: 水牛 体外生产 胚胎 玻璃化冷冻 程序化冷冻
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 31-36
• 分类号: TS253.2
• 字数: 5671字
• 语种: 中文

摘要

本研究采用不同来源的体外生产胚胎(屠宰场卵巢ⅣF胚胎,OPU-IVF胚胎,SCNT胚胎),系统研究了不同冷冻方法对水牛体外生产胚胎冷冻效果的影响,以完善水牛体外生产胚胎冷冻方法,进一步提高胚胎冷冻效果.试验选用6～7日龄囊胚分别用不同的冷冻液和不同冷冻方法进行胚胎冷冻.玻璃化冷冻液分别为40%EG、25%EG+25%DMSO和20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖;程序化冷冻液分别为10%甘油和0.05mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA.结果表明:(1)在玻璃化冷冻中,无论何种胚胎不同冷冻液的冷冻效果有明显的差异,但均以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液的冷冻效果最好,并且高于程序化冷冻的存活率;而对于程序化冷冻,用10%甘油作为冷冻液,屠宰场卵巢IVF胚胎的冷冻后存活率略高于用0.05 mol/L海藻糖+1.8 mol/L EG+0.4%BSA的冷冻后存活率,但差异不显著(P＞0.05).(2)VF胚胎利用程序化冷冻胚胎解冻后,在0～24 h内有76.5%胚胎复活,高于玻璃化冷冻的复苏率(48.9%)(P＜0.05);而与此相反,在24～48 h内,玻璃化冷冻胚胎的复苏率(42.6%)则高于程序化冷冻(23.5%)(P＜0.05).综上所述,各种来源的水牛体外生产胚胎均可进行冷冻保存,应用玻璃化冷冻的效果好于程序化冷冻,且以20%EG+20%DMSO+0.5 mol/L蔗糖作为冷冻液进行玻璃化冷冻效果最好,但程序化冷冻后的胚胎复苏速度明显快于玻璃化冷冻的速度.