青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的表达及酶学性质研究

• 作者: 张伟 张宇宏 曹威
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 聚半乳糖醛酸酶 青霉菌 毕赤酵母 异源表达
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 160-165
• 分类号: Q78
• 字数: 5090字
• 语种: 中文

摘要

筛选得到一株能分解果胶的青霉菌(Penicillium sp.),使用简并引物PCR和TAIL-PCR方法从该菌中克隆了一个聚半乳糖醛酸酶基因pgp1.pgp1基因全长1 225 bp,包含2个内含子,其cDNA全长1 104 bp,编码367个氨基酸和一个终止密码子,前18个氨基酸为信号肽序列.将pgp1基因连接pPIC9载体,在巴斯德毕赤酵母表达系统中进行了异源表达.在3L发酵罐水平,培养基中聚半乳糖醛酸酶活力达到700 U/mL.酶学性质测定表明,重组酶蛋白PGP1的最适pH为5.0,在pH4.0 -6.0下处理1h后,剩余酶活力超过90％；最适温度为38℃,以聚半乳糖醛酸为底物,PGP1的Km=(1.172±0.169)mg/mL,Vmax=(0.061±0.002) mg/min/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	中国农业科学院生物技术研究所	77	419	13.0	18.0
2	张宇宏	中国农业科学院生物技术研究所	14	50	4.0	6.0
3	曹威	河北农业大学食品科技学院	1	3	1.0	1.0