用多糖-破伤风类毒素结合苗制备抗流行性脑膜炎球菌多糖单克隆抗体

• 作者: 张春燕 张洪 李佩珊 李方和 李时君 陈妍 项美娟
• 来源期刊: 医药导报
• 学科: 医学
• 关键词: 菌苗 多糖抗体 A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖 结合苗 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 药物研究
• 页码范围: 709-712
• 分类号: R979.5|R943
• 字数: 4053字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/yydb.2011.06.005

摘要

目的 研制抗A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖单克隆抗体(GAMP mAb).方法 以A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素(GAMP-TT)耦联物免疫BALB/c小鼠,用常规细胞融合与克隆化技术获得一株能稳定分泌抗GAMP mAb的杂交瘤细胞株(2E7).采用秋水仙素阻断法测定其染色体数目,降植烷诱导法制备含该抗体的小鼠腹腔积液,辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单克隆抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)灰度扫描测定提取物纯度,改良过碘酸盐氧化法制备辣根过氧化物酶(HRP)标记抗GAMP mAb,并采用中和法及其抗原替代法对抗GAMP mAb的特异性进行初步的鉴定.结果 所获得的杂交瘤细胞(2E7)具有很好的生长特性,染色体数目约为139.73条;抗体分泌量适中,Ig亚类为IgG1,提取物浓度1.76～2.32 mg·mL-1,纯度97.2%,标记抗GAMP mAb的效价为1:25 600;抗原替代实验与中和实验对其特异性考核,初步结果证实2E7 mAb具有很好的抗GAMP特异性.结论 成功制备抗GAMP mAb,为GAMP-TT疫苗的生产监测及产品质量控制提供了必要的物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洪	武汉大学第一临床学院药剂科	182	1002	16.0	21.0
2	张春燕	华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心	15	27	3.0	4.0
3	李方和	华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心	13	23	3.0	4.0
4	陈妍	华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心	9	14	2.0	3.0
5	李佩珊	武汉大学第一临床学院药剂科	3	17	3.0	3.0
6	李时君	武汉大学第一临床学院药剂科	1	6	1.0	1.0
7	项美娟	武汉大学第一临床学院药剂科	1	6	1.0	1.0