2009H1N1流感病毒神经氨酸酶基因克隆与表达

• 作者: 张复春 张玲 肖春花 钟剑波 陈伟烈 魏绍静
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 2009 H1N1病毒 MDCK细胞 神经氨酸酶 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 997-1000
• 分类号: R373.13
• 语种: 中文

摘要

目的 制备2009 H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)重组蛋白,为建立H1N1快速检测方法 和神经氨酸酶抑制剂筛选模型奠定基础.方法 采用MDCK细胞方法 分离2009 H1N1流感病毒,提取病毒RNA,RT-PCR生成NA基因,构建原核表达载体PET- 102/D-TOPO-NA,IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳、Werstern Blotting鉴定重组蛋白.结果 成功分离2009H1N1流感病毒,NA蛋白119、152、275、292位氨基酸分别为Glu、Arg、His和Cys.SDS-PAGE凝胶电泳蛋白分子相对分子质量约为64 000,与预期一致.Western Blotting证实该蛋白具有神经氨酸酶抗原活性.结论 IPTG诱导原核表达神经氨酸蛋白的最适浓度为0.1 mmol/L.实验得到的蛋白尚需进一步纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张复春		7	35	3.0	5.0
2	张玲		18	117	7.0	9.0
3	陈伟烈		3	17	2.0	3.0
4	钟剑波		3	3	1.0	1.0
5	肖春花		4	7	2.0	2.0
6	魏绍静		3	4	1.0	2.0