人骨肉瘤细胞MG-63抗失巢凋亡的机制研究

• 作者: 张小磊 林丁盛 蒋良福 高伟阳
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 失巢凋亡 骨肉瘤 蛋白质 Bcl-2 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 8
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 165-170
• 分类号: R73-3
• 字数: 4410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.01.032

摘要

目的:观察人骨肉瘤细胞(MG-63)是否存在抗失巢凋亡(anoikis)的特性,并进一步研究其分子机制.方法:将MG-63细胞分别在普通6孔板和事先用聚甲基丙烯酸2-羧乙基酯(poly-HEMA)处理过的6孔板中培育24 h、48 h、72 h和7 d,人正常成骨细胞hFOB 1.19和人正常肾上皮细胞293T作对照,在光镜、电镜下观察细胞的形态以及细胞间连接,用流式细胞术检测细胞的凋亡率.通过RT-PCR方法检测不同时期、不同生长状态下,细胞中β-catenin和磷脂酰肌醇激酶(PI3K)的转录水平,并用Western blotting方法检测细胞内β-catenin、PI3K、Bcl-2和caspase-3、8、9的蛋白表达.结果:MG-63细胞在悬浮状态下培养,细胞相互之间聚集成比较致密的团块,没有发生明显的细胞凋亡(凋亡比例最高为30.29%).在贴壁生长和悬浮生长情况下,caspase-3和caspase-9的活化水平均无显著差异,而在悬浮状态下caspase-8在48 h时活化最多,然后活性减低,β-catenin和磷脂酰肌醇激酶的转录水平比对照组高,但蛋白表达水平对照组与实验组无显著差异.在悬浮状态下,Bcl-2的蛋白表达水平呈时间依赖性增长,在72 h达到最高.结论:MG-63细胞具有抗失巢凋亡的特性.细胞从细胞外基质中脱离后,早期可能激活caspase-8,从而启动并执行anoikis;Bcl-2的活化可能在后期抑制anoikis的发生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高伟阳	温州医学院附属第二医院骨科	73	606	13.0	20.0
2	蒋良福	温州医学院附属第二医院骨科	30	195	8.0	12.0
3	张小磊	温州医学院附属第二医院骨科	3	61	2.0	3.0
4	林丁盛	温州医学院附属第二医院骨科	8	41	3.0	6.0