大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 刘富强 张振书 徐静 王灿 白岚
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 1,25D3-膜相关快速反应类固醇结合蛋白 原核细胞 基因表达 纯化 胃钙素
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 538-542
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达并纯化大鼠1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合(1,25D3-Membrane associated rapid response steroid binding,1,25D3-MARRS)蛋白.方法 经RT-PCR扩增大鼠1,25D3-MARRS基因片段,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,M-NTA亲和层析纯化目的 蛋白,并进行Western blot鉴定.结果 重组原核表达质粒pET-32a-1,25D3-MARRS经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为77 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的20%;纯化的重组蛋白纯度达90%以上,且具有良好的反应原性.结论 已成功表达并纯化了重组1,25D3-MARRS蛋白,为进一步研究其性质、功能及分布特点奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张振书		57	191	8.0	10.0
2	刘富强		3	16	1.0	3.0
3	白岚		34	124	7.0	9.0
4	徐静		11	34	4.0	5.0
5	王灿		2	0	0.0	0.0