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摘要:
目的:了解毛细管内核酸偶联和游离辣根过氧化物酶(HRP)催化化学发光差异.方法:不同浓度HRP和经核酸杂交固定于毛细管内壁HRP催化化学发光反应.结果:①游离HRP催化化学发光线性检测范围窄(2.7×10<'-5>-1.3×10<'-6>mg/ml,R<'2>>0.96),下限为1.0×10<'-7>mg/ml;②2.0×10<'14>-2.0×10<'6>copies/ml的5μl单链DNA杂交后,1.0-10min时DNA浓度M对数(1g<'M>)与化学发光I值线性相关(R<'2>>0.99),且大于阴性I值平均数+3倍标准偏差(s.d);③5.0×10<'11>-5.0×10<'6>copies/ml的5μl PCR产物杂交后,10min内PCR产物对数1g<'M>与I值线性相关(R<'2>>0.97),且大于阴性I值平均数+3倍标准偏差(s.d).4.0-7.0min内1g<'M>与I值的R<'2>>0.99,3次平行检测标准偏差<5.0%.结论:毛细管内核酸杂交的HRP催化化学发光检测线性范围宽、灵敏度高、底物用量少,有望用于临床核酸分子杂交检测.
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文献信息
篇名 毛细管内均相辣根过氧化物酶(HRP)与核酸杂交偶联HRP催化化学发光比较研究
来源期刊 现代生物医学进展 学科 化学
关键词 微体系 固定化酶 辣根过氧化酶 化学发光
年,卷(期) 2011,(5) 所属期刊栏目 实验研究
研究方向 页码范围 857-860
页数 分类号 O657.8|Q814
字数 语种 中文
DOI
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 颜真 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 84 776 12.0 25.0
2 郭晏海 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 46 193 8.0 12.0
3 汪钦 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 5 0 0.0 0.0
4 包晗 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 7 20 3.0 4.0
5 向安 第四军医大学全军基因诊断技术研究所 6 4 1.0 2.0
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现代生物医学进展
旬刊
1673-6273
23-1544/R
16开
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
14-12
2001
chi
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