腺病毒穿梭载体介导牛源新孢子虫NcSAG1基因转染293细胞的表达

• 作者: 张守发 贾立军
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: NcSAG1基因 腺病毒穿梭载体 293细胞 表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 57-59
• 分类号: S828.2
• 字数: 2400字
• 语种: 中文

摘要

为了解腺病毒穿梭载体介导NcSAG1基因在293细胞中的表达情况,本试验应用PCR技术扩增牛源新孢子虫NcSAG1基因,构建pMD18T-NcSAG1克隆质粒和腺病毒重组穿梭质粒pCR259-NcSAG1,将鉴定正确的pCR259-NcSAG1重组质粒转染293细胞,应用免疫荧光试验(IFA)和Western blot技术检测pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中的表达.结果显示:扩增的牛源新孢子虫NcSAG1基因长度为982 bp,与GenBank中发表的NcSAG1(AF132217)核苷酸序列同源性为99%,IFA检测构建的pCR259-NcSAG1重组质粒在293细胞中得到瞬时表达,Western blot分析表达蛋白的分子置为33 ku,具有较好的反应原性.本试验为NcSAG1腺病毒载体疫苗的构建奠定了基础.