香鱼甘油-3-磷酸脱氢酶基因的克隆与表达

• 作者: 史雨红 郝晓娜 陆新江 陈炯
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: GPDH 香鱼 基因克隆 盐度适应 实时荧光定量PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 151-156
• 分类号: Q3
• 字数: 4260字
• 语种: 中文

摘要

GPDH(glycerol-3-phosphate dehydrogenase)是合成脂肪代谢中间产物甘油-3-磷酸的关键酶.通过设计简并引物从香鱼肝cDNA文库中克隆GPDH基因,该基因cDNA序列全长577个核苷酸,单一大的开放阅读框编码一个由351个氨基酸组成的分子量为37.9 kD的蛋白.蛋白序列分析表明,香鱼GPDH(aGPDH)与亚洲胡瓜鱼的GPDH序列同源性最高.系统进化树分析表明,GPDH的物种进化关系与目前接受的物种分类关系基本一致.实时荧光定量PCR结果显示,aGPDH基因在香鱼肝、脾、肾、脑、心和肌肉组织均有表达.香鱼成淡水适应以后,肝、脾、脑、心和肌肉的aGPDH的mRNA表达水平下调.成功构建重组表达质粒pET-32a-GPDH.SDS-PAGE试验表明,目的蛋白可以在大肠杆菌中大量表达;并制备了抗血清,能与目的蛋白起强的特异性反应,但不与细菌自身蛋白起反应.本研究有助于进一步理解鱼类盐度适应过程中的脂肪代谢调控机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	100	594	13.0	18.0
2	史雨红	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	47	397	10.0	18.0
3	陆新江	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	20	98	6.0	9.0
4	郝晓娜	宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0