阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的间充质转化

• 作者: 于长青 单路娟 孙艳玲 林洪丽 沈楠 王大鹏 王楠 董毳 谢华
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核心岩藻糖基化 上皮细胞间充质转分化 核心岩藻糖基转移酶 HK-2细胞
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1382-1388
• 分类号: R363
• 字数: 3896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2011.07.024

摘要

目的:探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程的影响.方法:利用转化生长因子β1(TGF-β1)建立肾小管上皮HK-2细胞EMT的模型,应用RNAi技术沉默HK-2细胞的α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,光镜下观察FUT8基因沉默后细胞形态变化,免疫印迹及免疫细胞化学方法测定细胞表型标记物蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)的表达变化,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果:TGF-β1孵育48 h后,HK-2细胞失去原有的上皮细胞形态,呈现纤维细胞形态,纤维细胞表型标记蛋白α-SMA、FSP-1及N-cadherin表达明显升高,而上皮细胞表型标记蛋白E-cadherin表达明显下降,同时伴有FUT8基因表达上调,细胞凋亡增加,而提前转染FUT8 siRNA能明显减弱上述这些反应.结论:FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK-2细胞的EMT过程;阻断核心岩藻糖基化修饰,能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程.