小鼠核结合因子a1基因启动子报告载体的构建及鉴定

• 作者: 崔壮 王宝利 王洪武 郑纺
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 基因 报告 萤光素酶类 核心结合因子类 转录启动子
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1133-1135
• 分类号: R965
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9896.2011.12.014

摘要

目的:构建小鼠核结合因子a1 (Cbfa1)基因启动子萤光素酶报告载体,并检测其驱动报告基因的转录活性.方法:以小鼠基因组DNA为模板,巢式PCR扩增含有Cbfal基因启动子(-1 000～+200 bp)的序列.限制性内切酶MluI和XhoI酶切这段序列后定向克隆到不含启动子的PGL3-Basic报告基因载体上,重组质粒命名为pGL3-Cbfa1.pGL3-Cbfa1瞬时转染成骨细胞系MC3T3-E1,检测其能否在Cbfa1基因启动子的调控下表达报告基因并提高萤光素酶活性.结果:pGL3-Cbfa1经酶切鉴定和序列分析证实与设计完全一致.细胞瞬时转染结果表明Cbfa1启动子具有转录活性,pGL3-Cbfa1的萤光素酶水平约是pGL3-Basic的35倍.结论:小鼠Cbfa1启动子报告基因载体的成功构建,为进一步将其用于抗骨质疏松药物的筛选与评价奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔壮		103	800	16.0	21.0
2	郑纺	天津中医药大学中医学院	27	215	8.0	14.0
3	王洪武	天津中医药大学中医学院	40	152	8.0	11.0
4	王宝利	天津中医药大学中医学院	1	1	1.0	1.0