芯片电泳快速检测乙型肝炎病毒YMDD变异

• 作者: 刘大渔 周小棉 王秋平 陈斌 雷秀霞 魏绍静
• 来源期刊: 中华医院感染学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 拉米夫定耐药变异 芯片电泳
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 636-639
• 分类号: R512.6+2
• 语种: 中文

摘要

目的 利用芯片电泳高分辨力和分析快速的优点,建立一种基于芯片电泳的乙型肝炎病毒YMDD耐药性突变的检测方法.方法 利用序列特异性PCR联合芯片电泳检测乙型肝炎病毒YMDD变异;将YVDD、YIDD标准质粒分别按梯度稀释108～100进行检测,将105拷贝/μl YVDD、YMDD质粒及YIDD、YMDD质粒分别按99:1、50:50、20:80、10;90、5:95、1:99混合检测,评价该方法的灵敏度;用芯片电泳法检测86份经拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清样品中YMDD突变情况,并将其结果与荧光定量PCR比较;两种方法结果不一致的标本进行DNA测序鉴定.结果 芯片电泳法能够在3 min内实现HBV YMDD变异检测,标准YVDD、YIDD质粒的检测限均为101拷贝/μl;不同比例(V:M或I:M)的混合质粒,最小比例突变检测率YVDD为5.0%,YIDD为10.0%;在86份标本中,芯片电泳检出总变异65份,突变率为75.6%,其中YVDD变异32份、YIDD变异23份、YVDD+YIDD混合变异为10份,荧光定量PCR检出总变异62份,突变率为72.1%,其中YVDD变异30份、YIDD变异29份、YVDD+YIDD混合变异为3份,两种方法检测结果差异无统计学意义(Kappa=0.609);两种方法检测结果不一致的标本20份,经测序结果显示,YMDD野生株6份、YVDD变异7份、YVDD+YIDD混合变异7份.结论 芯片电泳法检测YMDD变异具有简单、快速、灵敏度和准确度高的优点,适合于临床实验室开展乙型肝炎病毒YMDD变异的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周小棉	广州医学院附属广州市第一人民医院检验科	47	345	9.0	17.0
2	陈斌	广州医学院附属广州市第一人民医院检验科	11	33	4.0	5.0
3	王秋平	广州医学院附属广州市第一人民医院检验科	6	17	3.0	3.0
4	雷秀霞	广州医学院附属广州市第一人民医院检验科	20	89	5.0	8.0
5	刘大渔	广州医学院附属广州市第一人民医院检验科	16	50	4.0	6.0
6	魏绍静	广州市第八人民医院检验科	21	80	5.0	8.0