微管蛋白破坏对软骨细胞代谢功能的影响

• 作者: 卫小春 曹晓明 李琦 段王平 王磊 郭恒
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨,关节 微管蛋白 软骨细胞 胶原
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 1036-1040
• 分类号: R3
• 字数: 4869字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.15.008

摘要

目的 探讨微管蛋白破坏对体外关节软骨细胞代谢功能的影响.方法 2月龄新西兰白兔8只,处死后取双膝关节全层软骨,采用常规0.4%链酶菌蛋白酶和0.025%Ⅱ型胶原酶依次消化为软骨细胞培养3 d贴壁后,分为对照组和实验组,对照组继续用原代培养基(90%DMEM/F12±10%胎牛血清)培养,实验组在原代培养基中加入微管蛋白破坏剂秋水仙素(终浓度为0.1μmol/L).加药后第1、2天用Annexin-Ⅴ/PI流式细胞术检测软骨细胞早期凋亡率,加药后第6天细胞爬片HE染色观察细胞形态的改变,加药后第3、6、9天取细胞用实时定量荧光反转录聚合酶链式反应法测定软骨细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖以及MMP-13 mRNA的表达量,同时在加药后第3、6、9天取细胞上清液,用ELISA法和阿尔新蓝法检测各组上清液中Ⅱ型胶原和蛋白多糖的含量.结果 实验组第2天软骨细胞早期凋亡率明显高于对照组(P＜0.05);与对照组比较,实验组第6天软骨细胞呈不规则多角形,胞核深染且分裂象增多,细胞基质减少,实验组第3、6、9天软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达量较对照组均明显降低(P＜0.05),第6、9天实验组软骨细胞MMP-13mRNA表达较对照组明显增高(P＜0.01),同时实验组第3、6、9天上清液中的Ⅱ型胶原和蛋白多糖含量均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论 微管蛋白破坏可致软骨细胞早期凋亡,导致体外培养软骨细胞Ⅱ型胶原、蛋白多糖等基质成分合成减少,炎性因子MMP-13的表达增多.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卫小春		256	1901	21.0	31.0