携带DREAM基因小分子干扰RNA重组质粒的构建

• 作者: 田玉科 陈敏 项红兵
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 转录因子 DREAM 重组质粒 RNA干扰 组织工程
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1986-1989
• 分类号: R318
• 字数: 3135字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.11.021

摘要

背景:DREAM是一种多功能蛋白,在细胞中不同位置与不同靶蛋白结合,体外细胞培养和动物实验均证明DREAM参与了许多疾病的发病机制.目的:构建携带DREAM基因的小分子干扰RNA重组质粒.方法:设计并合成shRNA对应的两条互补的寡核苷酸链,pDC316-EGFP-U6质粒经BamHⅠ和HindⅢ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,转化感受态E.coli DH5α,获得阳性克隆进行PCR和测序鉴定.结果与结论:经PCR、酶切及测序证实,重组质粒pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6片段大小为473 bp,其中插入的片断序列和位点与预期完全一致,说明pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6重组质粒构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈敏	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	290	2590	26.0	39.0
2	田玉科	华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科	218	1564	18.0	31.0
3	项红兵	广州中医药大学附属第二医院麻醉科	6	16	2.0	4.0