蚜虫基因RNAi载体的构建及其在转基因烟草中dsRNA的表达分析

• 作者: 崔百明 彭明 李晓明 高朝宝
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 转基因 RNA干扰 Northern杂交 dsRNA Cathepsin B基因
• 年，卷（期）: 2011,（15）
• 所属期刊栏目: 生物技术-研究报告
• 页码范围: 229-232
• 分类号: Q78
• 字数: 3753字
• 语种: 中文

摘要

RNAi机制可以通过dsRNA诱导同源mRNA的降解,从而导致该基因转录后沉默.RNA干扰作用从发现以来就具有了利用转录后基因沉默(PTGS)来进行抗虫的一种潜在可能性.针对dsRNA的这种作用,研究中提取蚜虫RNA,克隆出蚜虫Cathepsin B基因的干扰片段并构建出RNAi载体,转入本氏烟草中,在转基因烟草体内表达dsRNA.成功构建RNAi载体后,通过农杆菌转化和叶盘法将RNAi载体导入烟草中并采用组织培养方法培养出转基因烟草,通过PCR鉴定显示15株生根的转基因烟草中14株显示阳性.提取转基因烟草的RNA进行RT-PCR和Northern表达分析显示转基因烟草植株中dsRNA表达的存在.实验结果说明了在转基因植物体内表达RNAi载体可以产生dsRNA,从而在蚜虫进食植物时达到利用dsRNA抗蚜虫的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭明	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	136	1114	16.0	25.0
2	李晓明		1	5	1.0	1.0