哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞长期培养体系的建立及临床意义

• 作者: 刘俊 赵荣祥
• 来源期刊: 浙江医学
• 学科: 医学
• 关键词: 耳蜗 感觉上皮 长期培养 毛细胞
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 153-156,189
• 分类号: R76
• 字数: 4518字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2785.2011.02.002

摘要

目的 建立哺乳动物耳蜗感觉上皮细胞（CSEC）长期培养体系，为內耳毛细胞再生、分子及基因研究提供细胞来源.方法 取1d龄wistar大鼠耳蜗感觉上皮作组织块培养，有限稀释法纯化并得到CSEC单克隆细胞系.胰蛋白酶+胶原酶消化培养传代，传25代.取第25代CSEC，在倒置显微镜、透射电镜下对CSEC的生长特征、形态结构进行观察；免疫细胞化学检测细胞角蛋白18、波形蛋白，鉴定CSEC细胞来源.免疫荧光细胞化学、 RT-PCR检测毛细胞标志物Brn.3a 、Calretinin及AchRa9、Myosin Ⅶa mRNA的表达，鉴定CSEC特征.结果 第25代CSEC均呈扁平、多角形、核大而圆的上皮细胞形态，细胞之间连接紧密，单层时呈"铺路石样"外观，可见"dome"结构；其可表达细胞角蛋白和不表达波形蛋白，微绒毛丰富，细胞间连接紧密，提示其为上皮细胞来源；并可表达毛细胞特征性标志物Brn3.a 、Calretinin及AchRa9、Myosin Ⅶa mRNA.结论 本实验成功建立了哺乳动物CSEC长期培养体系。长期培养的CSEC性状未发生明显改变，具有毛细胞前体细胞的特征.这为毛细胞再生的机制及内耳分子、基因研究提供了稳定的细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘俊	浙江省中医院耳鼻喉科	14	8	2.0	2.0
2	赵荣祥	浙江省中医院耳鼻喉科	25	65	4.0	7.0