AdMax腺病毒介导c-kit RNA干扰对胃肠间质瘤裸鼠移植瘤株生长的影响

• 作者: 林维浩 王天宝 石汉平 董文广 黄文生
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肠道间质肿瘤 RNA干扰 原癌基因蛋白质c-kit 腺病毒科 小鼠,裸
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 页码范围: 560-563
• 分类号: R73
• 字数: 3539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2011.08.015

摘要

目的 构建转导c-kit基因RNA干扰(RNAi)重组AdMax腺病毒,探索一种新的胃肠间质瘤(GIST)治疗手段.方法 合成带有限制性内切酶酶切序列c-kit shRNA.T4 DNA聚合酶作用下,c-kit shRNA插入穿梭质粒PDC316-EGFP-U6,形成PDC316-EGFP-U6-C-KIT.AdMax腺病毒包装系统同源重组生成腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT.建立GIST裸鼠异位移植瘤株.实验组与对照组分别给予AdEGFP-U6-C-KIT和空病毒瘤内注射,比较两组瘤株体积、抑瘤率及CD117免疫组化表达差异.结果 琼脂糖电泳证实c-kit shRNA长度约50 bp.PDC316-EGFP-U6-C-KIT测序显示含有目的基因.AdEGFP-U6-C-KIT感染293细胞可见绿色荧光.纯化后重组腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT物理滴度为5×1011vp/ml,感染性滴度(TCID50)为1.26×1010 pfu/ml.实验结束时,实验组肿瘤体积平均为(75±23)mm3,对照组平均为(989±31)mm3,差异有统计学意义(P=0.000).实验组抑瘤率为59.6%.CD117阳性表达率实验组为20%,对照组为100%,差异有统计学意义(P=0.001).结论 重组腺病毒AdEGFP-U6-C-KIT可高效转导c-kit RNAi、抑制c-kit基因表达及GIST裸鼠移植肿瘤生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王天宝	中山大学附属第一医院外科	79	368	10.0	14.0
2	林维浩	中山大学附属第一医院外科	29	124	6.0	10.0
3	石汉平	中山大学附属第一医院外科	92	754	14.0	24.0
4	董文广	中山大学附属第一医院外科	44	213	7.0	12.0
5	黄文生	中山大学附属第一医院外科	44	99	6.0	8.0