VEGF真核表达载体构建及其转染骨髓间充质干细胞的表达

• 作者: 刘茹 李秋平 杜江 王斌 陈春芳
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 真核表达载体 转染 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 21-24
• 分类号: R3
• 字数: 2802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2011.01.009

摘要

目的 构建大鼠血管内皮细胞生长因子164(vascular endothelial growth factor,VEGF164)真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF164,观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)转染pcDNA3.1(-)/VEGF164基因后,外源性基因VEGF在蛋白水平的表达,为其在治疗肺组织损伤中的应用奠定基础.方法 应用DNA重组技术构建VEGF164真核表达载体.采用脂质体介导的转染方法将pcDNA3.1(-)/VEGF164转染大鼠MSCs,并设立空质粒对照组(转染pcDNA3.1空载体)、脂质体对照组,用细胞免疫组化和Western blot检测大鼠MSCs 中VEGF164蛋白的表达情况.结果 重组质粒pcDNA3.1(-)/VEGF164测序结果与基因库(GENEBANK)中序列一致.细胞免疫组化检测显示pcDNA3.1(-)/VEGF164转染组MSCs中可见散在黄色颗粒,而空质粒对照组和脂质体对照组均未见明显黄色颗粒.Western blot检测pcDNA3.1(-)/VEGF164转染MSCs 72 h后,细胞裂解产物中VEGF含量明显高于空质粒对照组和脂质体对照组.结论 成功构建了大鼠VEGF164真核表达载体,实现VEGF164基因在大鼠MSCs的成功转染,并有外源性基因及蛋白的表达,具有促进肺组织损伤修复的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜江	南方医科大学珠江医院儿科	65	329	10.0	12.0
2	王斌	南方医科大学珠江医院儿科	106	509	12.0	16.0
3	刘茹	南方医科大学珠江医院儿科	3	43	2.0	3.0
4	陈春芳	南方医科大学珠江医院儿科	6	11	3.0	3.0