表面活性剂稳定性碱性蛋白酶纯化及性质研究

• 作者: 侯进慧 李超 高兆建
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 地衣芽抱杆菌XG12 碱性蛋白酶 分离纯化 表面活性剂 酶学性质
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 211-216
• 分类号: Q814.1
• 字数: 4425字
• 语种: 中文

摘要

从地衣芽抱杆菌(Bacillus licheniformis)XG12发酵液中分离纯化表面活性剂稳定性碱性蛋白酶,并对酶学性质进行研究.利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析等方法,分离纯化到了均一的酶蛋白,酶纯度提高了42.6倍,回收率为25.3% SDS-PAGE及Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析显示酶蛋白为单亚基蛋白,分子质量约为29.5kD.在pH7.0～11.0范围内酶活性及稳定性较高,最适作用pH值为10.0,最适作用温度40℃.Mg2+、Ca2+、及Mn2+对酶有明显激活作用.丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂强烈抑制酶活性,表明所纯化到的蛋白酶为丝氨酸蛋白酶.酶分别对终质量浓度为0.1g/l00mL的阴离子表面活性剂SDS、阳离子表面活性剂CTAB和体积分数为1%的非离子型表面活性剂 Tween-80、Tween-20、Triton X-100以及氧化剂均具有很强的稳定性.