诱导性多潜能干细胞滋养层制备条件的实验研究

• 作者: 冯刚 刘康 刘涛 宋桂芹 罗栩伟 陈桂秀 陈竹
• 来源期刊: 西部医学
• 学科: 医学
• 关键词: 诱导性多潜能干细胞 胚胎成纤维细胞 滋养层
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学与实验研究
• 页码范围: 401-404
• 分类号: R813.1
• 字数: 3057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3511.2011.03.001

摘要

目的:制备小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEFs)滋养层,用于诱导性多潜能干细胞(Induced Pluripotent Stem Cells,iPSCs)的体外培养.方法:取13.5～15.5天胎龄的胎鼠,采用组织消化法分离原代培养成纤维细胞,对MEFs的生长形态,生长曲线进行观察.采用10μg/ml丝裂霉素C预处理P2～P3代MEFs2～3h制备出细胞滋养层,在该滋养层上进行iPSCs培养,观察iPSCs的集落生成情况,并行碱性磷酸酶细胞染色.结果:MEFs经丝裂霉素C预处理后细胞既不增殖,也不会死亡,仍保持分泌多种生长因子的能力.iPSCs在MEFs滋养层上生长良好,类似于胚胎干细胞一样能形成"鸟巢"状集落,并可维持iPSCs正常形态,抑制其分化而不影响活力,碱性磷酸酶染色阳性.结论:利用诱导性多潜能干细胞滋养层方法制备的细胞滋养层,能有效支持iPSCs的生长,为进一步开展iPSCs的研究提供了理论依据和实验基础.