米醋沉淀中Bacillus subtilis DNA提取及ERIC-PCR体系条件优化

• 作者: 任文雅 孙宝国 廖永红 徐瑾 沈晗 金志刚
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 细菌 分离 DNA提取 ERIC-PCR 优化
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 212-215,219
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文

摘要

利用稀释平板法从米醋沉淀中分离获得细菌,通过对其进行16S Rdna分子鉴定,表明该细菌为枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis).以该菌为实验材料,研究了细菌基因组DNA的提取方法,并将ERIC-PCR法首次应用于醋液菌种.对此反应体系的主要因素进行了优化,最终建立了适合于本实验室的ERIC-PCR体系.结果表明,采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要;建立的反应体系为:25μL反应体积10×扩增缓冲液(含Mg2+)2.5μL,20pmol/L ERIC-PCR引物E1 1.0μL,20pmol/Μl ERIC-PCR引物E21.0μL,DNA模板21×L,2.5mmol/L dNTPs混合液1.61μL,taq聚合酶0.9μL,双蒸水补齐;PCR反应程序为:94℃变性4min,1个循环;94℃变性30s,58℃退火40s,72℃延伸1min,30个循环;72℃C延伸4min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙宝国	北京工商大学化学与环境工程学院	339	3386	28.0	40.0
2	廖永红	北京工商大学化学与环境工程学院	30	275	10.0	15.0
3	沈晗	北京工商大学化学与环境工程学院	12	81	6.0	8.0
4	徐瑾	北京工商大学化学与环境工程学院	8	56	4.0	7.0
5	任文雅	北京工商大学化学与环境工程学院	11	68	5.0	8.0
6	金志刚	北京工商大学化学与环境工程学院	1	3	1.0	1.0