人表皮干细胞改良培养及其组织工程皮肤的构建

• 作者: 张彦刚 张战凤 折涛 朱华宇 胡大海 蔡维霞
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 医学
• 关键词: 表皮干细胞 酶消化法 组织工程皮肤 分离 培养
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 79-82
• 分类号: R318
• 字数: 3946字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-6455.2011.01.034

摘要

目的:改良传统人表皮干细胞(hESCs)分离、培养方法,为组织工程皮肤构建提供产率更高、活力更好的种子细胞.方法:应用改艮的酶消化法(改良法)及传统酶消化法(传统法)分离、培养hESCs,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法绘制生长曲线、免疫组化法测定hESCs标志物角蛋白19(K19)和β1整合素的表达,并且进一步比较上述两种方法所获种子细胞构建的组织工程皮肤的形态学的特性.结果:台盼蓝染色显示改良法细胞消化分离数为92.25±15.61个,传统法细胞消化分离数为68.50±26.91个(P＜0.01);改良法活细胞比率是(94±-0.01)%,传统法活细胞比率是(75±0.04)%(P＜0.05).在8天时改良法细胞MTT法OD值为1.300,传统法为0.779,改良法较传统法活力好,增殖快;细胞免疫组织化学染色显示表皮干细胞标志物角蛋白19(K19)和β1整合素均为阳性染色;HE染色结果显示采用改良法hESCs构建的组织工程皮肤表皮细胞复层层数为5～6层、基底细胞排列整齐,传统法hESCs构建的组织工程皮肤表皮细胞复层层数为3～4层、基底细胞排列散乱.结论:利用改良的酶消化法可获得数量更多、活力更好的人表皮干细胞,为以hESCs为种子细胞构建组织工程皮肤奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡大海	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	165	1002	15.0	20.0
2	张战凤	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	9	46	4.0	6.0
3	蔡维霞	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	11	28	3.0	5.0
4	折涛	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	7	54	5.0	7.0
5	张彦刚	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	2	14	1.0	2.0
6	朱华宇	第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科	3	17	2.0	3.0