猪传染性胃肠炎病毒Sa基因的克隆与序列分析

• 作者: 温海燕
• 来源期刊: 山东畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 胃肠炎病毒 Sa基因 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 1-3
• 分类号: S852.65+9.4
• 字数: 3019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1733.2011.04.001

摘要

将猪传染性胃肠炎病毒接种ST细胞进行增殖,待细胞出现明显的病变后,将细胞反复冻融3次收获病毒.根据GenBank中已发表的猪传染性胃肠炎病毒S基因的序列,设计合成了l对扩增S基因包含A抗原位点724bp基因片段(Sa)的引物,引物两端分别有BamH I和HindⅢ的酶切位点.以感染细胞提取的病毒RNA为模板,经RT-PCR扩增得到目的片段,然后将其克隆到pMD18-T载体上,经蓝白斑筛选和酶切鉴定选择阳性克隆进行序列测定,构建成功的重组质粒命名为pMD18-T-Sa.用DNAstar软件将其与GenBank上的序列进行同源性比较,结果表明,核苷酸同源性为97%以上,氨基酸同源性为93%以上.根据猪传染性胃肠炎病毒Sa基因核苷酸序列绘制的系统进化树,结果表明,试验株与TH-98株亲缘性最近.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	温海燕	菏泽学院动物科学系	19	16	2.0	3.0