一种基于三顺反子表达载体的生物素诱导表达系统的建立

• 作者: 何文俊 刘兴茂 刘红 叶玲玲 李世崇 陈昭烈
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物素 三顺反子 哺乳动物细胞 诱导表达系统 EGFP
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1404-1408
• 分类号: Q813|Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种以无毒的生物素为诱导剂的哺乳动物细胞诱导表达系统.方法:通过基因组PCR或重叠延伸PCR获得该系统的三个基本构件:大肠杆菌生物素连接酶(BirA)、链亲和素-四环素依赖的抑制因子融合蛋白(SA-TetR)和生物素化信号-VP16转录激活结构域融合蛋白(Avitag-VP16).将上述基因连入三顺反子表达载体,与响应载体一起共转染293f细胞,以EGFP为报告基因,检测EGFP荧光强度随培养体系中生物素浓度变化的情况.结果:随着生物素浓度的增加,目的基因表达出现OFF-ON-OFF的变化,诱导状态下的EGFP荧光强度约为抑制状态下的3倍.结论:可通过调节生物素浓度对目的基因的表达进行可逆的调节,该系统是一种有应用前景的诱导表达系统.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李世崇	军事医学科学院生物工程研究所	47	184	7.0	10.0
2	陈昭烈	军事医学科学院生物工程研究所	62	367	9.0	16.0
3	刘红	军事医学科学院生物工程研究所	51	249	7.0	12.0
4	叶玲玲	军事医学科学院生物工程研究所	36	103	5.0	7.0
5	刘兴茂	军事医学科学院生物工程研究所	25	80	5.0	7.0
6	何文俊	军事医学科学院生物工程研究所	9	21	3.0	4.0