小鼠角膜上皮细胞消化培养法和组织块培养法的比较研究

• 作者: 刘汉强 马小力
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 角膜 上皮 细胞培养 组织块法 消化法
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 英文论著
• 页码范围: 939-942
• 分类号: R77
• 字数: 1568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2011.06.001

摘要

目的:比较小鼠角膜上皮细胞消化培养法和组织块培养法.方法:分别使用消化培养法和组织块培养法培养小鼠角膜上皮细胞.比较两种方法中小鼠角膜上皮细胞的克隆形成率(CFE)和群体倍增(PD).通过Western blotting方法检测p63、角蛋白19以及角蛋白12的表达.结果:其中80%组织块培养法的原代培养可成功传代,而仅12%的消化培养法原代培养可成功传代;两者比较有显著性差异(P<0.05).传代培养中,组织块培养法中55%的第一代(P1)细胞可以传代超过P10并继续稳定传代至少可传至P25.而消化培养法传代至P2即不能融合.在P1,组织块培养法细胞的CFE高于消化培养法(P=0.02);而组织块培养法P20细胞的CFE又显著高于其P1细胞(P=0.001).免疫荧光染色显示消化培养法的P1细胞和组织块培养法的P1,P20细胞均表达p63和K19.K12仅在消化培养法的P1细胞和组织块培养法的P1中表达,而组织块培养法的P20细胞中,K12阴性表达.结论:小鼠角膜上皮细胞的培养,组织块培养法优于消化培养法.