PLCε特异性shRNA对人膀胱癌生物学行为的影响

• 作者: 刘琪 张彦懿 欧俐苹 程洪林 罗春丽 赵懿
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 细胞增殖 肿瘤浸润 短发夹RNA 磷脂酶Cε
• 年，卷（期）: 2011,（33）
• 所属期刊栏目: 泌尿专题
• 页码范围: 3342-3345,后插1
• 分类号: R322.6
• 字数: 3642字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2011.33.005

摘要

目的 探讨人源磷脂酶Cε(PLCε)特异性短发夹RNA(shRNA)对人膀胱癌增殖、凋亡、侵袭、转移能力的影响.方法 用携带PLCε shRNA基因的真核表达质粒pGenesil- PLCε转染BIU-87细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞PLCε mRNA和蛋白的变化.分别用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术和免疫组化检测BIU-87细胞及裸鼠移植瘤增殖情况和细胞周期的变化;采用RT-PCR检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA的变化;采用Transwell小室体外侵袭法及明胶酶谱分析细胞的侵袭能力.结果 转染pGenesil-PLCε质粒的细胞可明显抑制PLCε基因和蛋白表达水平(P<0.05);MTT、流式细胞术与免疫组化检测结果表明转染pGenesil- PLCε质粒的细胞生长明显受抑制(P<0.05),且细胞周期阻滞于G0/G1期;转染pGenesil- PLCε质粒的细胞 Bcl-2/Bax mRNA明显降低(P<0.05);明胶酶谱及侵袭实验显示转染pGenesil- PLCε质粒的细胞侵袭、转移能力明显下降(P<0.05).结论 特异性shRNA干扰PLCε基因可抑制膀胱癌的生长,其作用机制可能与抑制肿瘤增殖、诱导细胞凋亡及抑制侵袭转移有关,PLCε为膀胱癌基因治疗的潜在靶点.