五指山小型猪胰岛分离和纯化的初步研究

• 作者: 向广阳 杨学伟 王业增 章乐虹 蒋小峰 钱滔来 陈德 陈松伟
• 来源期刊: 临床医学工程
• 学科: 医学
• 关键词: 小型猪 胰岛 异种 移植
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1343-1344,1347
• 分类号: R587.1
• 字数: 2083字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4659.2011.09.1343

摘要

目的 探讨封闭群五指山小型猪胰岛的分离和纯化,并在体外检测分离纯化后的胰岛对高低糖刺激反应来判定胰岛功能.方法 7只雄性五指山小型猪和6只普通成年猪的胰腺分别被用于胰岛分离纯化实验研究.胰腺获取后,胰管插管并注入消化液(胶原酶V,1.8岁L),胰腺充分灌注后,切成碎块并转入消化罐内消化,消化液过滤后并经梯度离心后,收集纯化的胰岛,经双硫宗(DTZ)染色后计数,并在不同浓度葡萄糖培养液里检测释放的胰岛素浓度来判定胰岛的活性.结果 小型猪胰腺解剖上更接近人类,胰腺消化时间平均为(30±8)min,消化程度为(70±8)%,胰岛产量纯化前为(5500±1 025)IEQ/g,纯化后为(4 120±625)IEQ/g,纯度为85%,活力为80%;取自屠宰场猪胰岛产量纯化前为(2 500±625)IEQ/g,纯化后为(1 720±435)IEQ/g,活力为60%.镜下观察,小型猪胰岛镜下可被DTZ染色呈红色,纯化后的胰岛大小一致,形态完整,体外培养小型猪胰岛在低糖和高糖刺激下胰岛素释放分别为(1.346±0.128)ng/mL和(2.565±0.208)ng/mL,差异有显著性意义(P<0.05),刺激指数为(1.908±0.152),而取自屠宰场猪胰岛素释放分别为(1.246±0.18)ng/mL和(1.4±0.208)ng/mL,差异无显著性.结论 封闭群五指山小型猪胰腺解剖结构和人类相似,分离纯化后的胰岛产量高,功能良好,适合异种胰岛移植.