人Tim-3基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 刘东升 刘津麟 周南进 李冬宏 谢勇
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: Tim-3基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2011,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3427-3430
• 分类号: Q75|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:为了构建可在真核细胞中高效表达人Tim-3 (hTim-3)的真核表达质粒,以便用于hTim-3肿瘤免疫治疗研究.方法:取健康人外周血的单个核细胞,用高保真聚合酶扩增hTim-3基因,先进行hTim-3基因的亚克隆,用Bgl Ⅱ和Sal Ⅰ限制性内切酶切下带有酶切位点的hTim-3基因,最终构建hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N1 -hTim-3.用脂质体方法转染质粒至肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937中.48h后荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光表达情况,初步判断转染效率.结果:酶切和测序鉴定证实目的基因hTim-3正确插入到真核表达载体pEGFP-N1中,转染肝癌细胞SMMC7721和巨噬细胞U937后,在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达.结论:成功构建了可在真核细胞中高效表达hTim-3基因的真核表达质粒pEGFP-N 1-hTim-3,为进一步研究hTim-3的肿瘤免疫治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢勇	南昌大学第一附属医院消化研究所	109	628	13.0	18.0
2	刘东升	南昌大学第一附属医院消化研究所	13	53	4.0	7.0
3	周南进	南昌大学医学科学研究所	9	38	4.0	6.0
4	刘津麟	南昌大学医学科学研究所	1	1	1.0	1.0
5	李冬宏	南昌大学医学科学研究所	1	1	1.0	1.0