有机磷农药三唑磷单克隆抗体制备及鉴定

• 作者: 孙远明 徐怀德 徐振林 樊晓博 沈玉栋 王弘 雷红涛 韦倩妮 黄魁英
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 农学
• 关键词: 三唑磷 单克隆抗体 酶联免疫吸附检测
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 154-157
• 分类号: S481.8|TS201.6
• 字数: 2383字
• 语种: 中文

摘要

采用活泼酯法和混合酸酐法将三唑磷半抗原(TZPM-Hap)与牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶联,分别制备出一种免疫抗原(TZPM-A-BSA)和两种包被抗原(TZPM-A-OVA和TZPM-M-OVA).通过免疫小鼠及细胞融合,并对杂交瘤细胞进行经多次筛选和亚克隆得到1株产三唑磷单克隆抗体阳性细胞株(FC3),其抗体亚类为IgM.辛酸-硫酸铵沉淀法纯化后的抗体经间接ELISA检测,该方法IC50=9.7μg/L,最低检测限(LOD)为1.0μg/L,定量检测线性范围(IC20～IC80)为2.5～100.0μg/L,与其他有机磷农药结构类似物无明显交叉反应,显示出高度的特异性.该抗体可进一步用于免疫分析试剂盒开发.