转基因玉米59122品系的特异性检测

• 作者: 何景 张南 杨蓉 罗云波 许文涛 陆姣 黄昆仑
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因作物 品系特异性检测 半巢式聚合酶链式反应 反向聚合酶链式反应 二重聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 139-142
• 分类号: Q789|S513
• 字数: 4689字
• 语种: 中文

摘要

使用反向聚合酶链式反应(PCR)技术克隆了转基因求米59122的外源基因与玉米基因组之间的两段侧翼序列,并据其左侧侧翼序列设计了具品系特异性的引物,运用半巢式PCR技术建立了59122的品系特异性二重PCR检测方法,扩增片段100bp,横跨pat终止子与转基因玉米侧翼基因之间.以转基因玉米59122、MON863、MON810、GA21、NK603,转基因大豆Roundup Ready和转基因油菜GT73等为材料,证明本方法与其他转基因作物具有高特异性.本方法在检测59122时,确定出连接体系中线性DNA的最佳质最浓度为lng/μL左右,检出限达到0.1%,灵敏度为38个单倍体基因组拷贝数.因此可准确、快速、高效地检测转基因玉米及其产品,或作为常规PCR定性检测后的验证方法.