食品中单增李斯特菌环介导等温扩增检测技术

• 作者: 吴萍兰 孙慧宇 宋阳威 徐政 徐波 徐继承 房超 易海华 王云飞 祝长青 赵金伟
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 医学
• 关键词: 单增李斯特菌 环介导恒温基因扩增方法 快速检测
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 203-207
• 分类号: R155.31
• 字数: 3867字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种快速、简单地检测食品中单增李斯特菌的环介导恒温基因扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并初步建立荧光定量LAMP检测单增李斯特菌的方法.方法:根据LAMP方法的原理,设计LAMP检测引物,建立LAMP检测方法,同时对方法的特异性、灵敏度、重复性及初始拷贝数的对数值与反应时间之间的线性关系进行评估.结果:使用LAMP引物可以在0.5h内完成检测工作;LAMP检测技术的灵敏度高出聚合酶链式反应检测技术100倍以上,检出限达到1.72×101拷贝/反应,与其他食源性致病菌无交叉反应,平均实验间变异系数小于5%;反应时间与初始模板浓度的常用对数值有良好的线性关系(R2=0.9994).结论:本方法具有快速、灵敏、特异、操作简单、设备要求低的特点,具有广阔的应用前景.