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RNA干涉介导的Plk1沉默对乳腺癌细胞恶性生物表型的影响
RNA干涉介导的Plk1沉默对乳腺癌细胞恶性生物表型的影响
作者:
王冰蝉
耿怀成
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Plk1
乳腺癌
RNA干涉
细胞周期
细胞凋亡
摘要:
目的:研究乳腺癌细胞中丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1基因表达下调后对其恶性生物表型的影响.方法:利用pSilencer4.1-CMVneo质粒,分别构建针对Plk1基因的RNA干涉载体(pSilencer4.1-shPlk1),利用脂质体Lipofectamine2000转染MCF-7细胞,G418筛选稳定的转染细胞系.半定量RT-PCR和Western blot分别检测Plk1基因mRNA和蛋白表达,MTT和克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡的变化,最后分析MCF-7细胞对紫杉类药物(紫杉醇和多西他赛)化疗敏感性的变化.结果:成功筛选了稳定转染细胞系(MCF-7/shPlk1和MCF-7/shcontrol).同MCF-7/shPlk1细胞相比,MCF-7/shPlk1细胞中Plk1基因mRNA和蛋白表达水平分别下调65.8%和74.4% (P<0.05).同MCF-7/shcontrol,MCF-7/shPlk1细胞增殖速度显著抑制,到第5天时抑制率达到44.9± 3.2% (P<0.05).同时,MCF-7/shPlk1细胞的克隆形成能力显著降低(P<0.01).流式细胞仪技术分析细胞周期结果表明:MCF-7/shPlk1细胞的G2/M期细胞比例显著增加了21.1+ 4.1%,而S期细胞比例则显著降低了(18.5±3.1%;P<0.05).流式细胞仪技术分析细胞凋亡结果表明:MCF-7/shPlk1细胞的凋亡率约显著增加了13.1±2.3%(P<o.05).同时还发现:MCF-7/shPlk1细胞中激活的caspase-3蛋白显著增加,Bcl-2蛋白显著降低,而Bax蛋白则显著增加.结论:RNA干涉载体能特异性下调乳腺癌细胞中Plk1基因的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖和体外克隆形成能力,同时诱导乳腺癌细胞的G2/M期阻滞和细胞凋亡率显著增加.因此,靶向Plk1基因的生物治疗有望成为未来临床乳腺癌的一个重要的辅助治疗策略.
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篇名
RNA干涉介导的Plk1沉默对乳腺癌细胞恶性生物表型的影响
来源期刊
现代生物医学进展
学科
医学
关键词
Plk1
乳腺癌
RNA干涉
细胞周期
细胞凋亡
年,卷(期)
2011,(20)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
3830-3834
页数
分类号
R737.9
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
耿怀成
南京军区南京总医院肿瘤内科
28
273
9.0
15.0
2
王冰蝉
西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤外科
2
5
2.0
2.0
传播情况
被引次数趋势
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(/年)
引文网络
引文网络
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Plk1
乳腺癌
RNA干涉
细胞周期
细胞凋亡
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
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期刊影响力
现代生物医学进展
主办单位:
黑龙江省森工总医院
哈尔滨医科大学附属第四医院
出版周期:
旬刊
ISSN:
1673-6273
CN:
23-1544/R
开本:
16开
出版地:
黑龙江省哈尔滨市和兴路32号
邮发代号:
14-12
创刊时间:
2001
语种:
chi
出版文献量(篇)
22114
总下载数(次)
63
总被引数(次)
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