负载人miR-29a复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定

• 作者: 刘志鹏 吴友良 李学成 熊晓峰 王军 范亚川 陈陵 高军
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNAs hsa-miR-29a 人胚肾293细胞 复制缺陷型腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1045-1048
• 分类号: R735
• 字数: 3214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2011.10.001

摘要

目的 包装负载人miR-29a前体全长cDNA(pre-miR-29a)的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-miR29a).方法 将pre-miR-29a全基因合成后,插入腺病毒穿梭质粒pDC315,与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1、3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装重组慢病毒Ad-miR29a,扩增、收集并纯化.对纯化后的Ad-miR29a进行滴度测定、感染性鉴定及PCR鉴定.结果 包装成功的腺病毒载体具有良好的感染性,纯化浓缩后的病毒滴度可达5 x 109pfu/ml.PCR鉴定Ad-miR29a可扩增出pre-miR-29a特异片段,而对照Ad-LacZ不能扩增出pre-miR-29a特异片段.Ad-miR29a感染人胃癌SGC-7901细胞后,可明显提高miR-29a的表达丰度.结论 成功包装了负载miR-29a的复制缺陷型腺病毒载体,为进一步研究microRNAs在肿瘤发生发展中的作用,以及miR-29a在肿瘤治疗中的价值奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王军	解放军324医院消化内科	9	47	5.0	6.0
2	李学成	解放军324医院消化内科	13	66	6.0	7.0
3	吴友良	解放军324医院药剂科	9	19	3.0	4.0
4	范亚川	解放军324医院消化内科	9	32	4.0	5.0
5	刘志鹏	解放军324医院消化内科	6	30	4.0	5.0
6	熊晓峰	解放军324医院消化内科	3	16	2.0	3.0
7	高军	解放军324医院药剂科	1	7	1.0	1.0
8	陈陵	解放军324医院消化内科	5	18	3.0	4.0