移植自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合物修复脊髓损伤

• 作者: 刘忠英 占小多 康晓宁 张文影 张玮玮 戴翔 江沿文 董为人 郭家松
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 自聚合肽纳米纤维支架 RhoA RNA干扰 siRNA 脊髓损伤 修复
• 年，卷（期）: 2011,（16）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2895-2900
• 分类号: R318
• 字数: 5019字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.16.011

摘要

背景:脊髓损伤后RhoA表达增高是神经再生困难的主要原因之一,课题在前期研究证明自聚合肽纳米纤维材料能较好地促进脊髓损伤后结构与功能修复的基础上,建了自聚合肽纳米纤维材料与RhoA-siRNA复合材料用于修复脊髓损伤.目的:探讨自聚合肽纳米纤维材料介导siRNA干扰RhoA表达促进脊髓损伤修复.方法:54只昆明小鼠随机数字表法分为4组.假手术组仅作脊髓暴露,他3组在切除1 mm脊髓组织制备全横断脊髓损伤模型后,别于损伤腔内填充生理盐水、自聚合肽纳米纤维支架或含有RhoA特异性siRNA复合物.通过FAM标记检测siRNA转染效率;免疫组化检测RhoA表达;免疫组化和定量分析检测再生神经纤维;行为学检测评定后肢功能恢复.结果与结论:移植FAM标记的含有RhoA特异性siRNA复合物后,脊髓内的神经纤维及大脑皮质运动区神经元胞体内均可检测到FAM荧光信号,示siRNA可从复合材料中释放到组织中并成功导入靶细胞.与SAPNS组和生理盐水组相比,有RhoA特异性siRNA复合物和自聚合肽纳米纤维支架组可显著降低RhoA在神经元的表达,高脊髓损伤区内NF阳性神经纤维的密度,进后肢功能的恢复.结果提示通过自聚合肽纳米纤维支架的介导,有RhoA特异性siRNA复合物能有效干扰RhoA表达,而促进脊髓损伤的修复.