扩展青霉基因组DNA五种提取方法比较

• 作者: 何鸿举 吕茜 李亚菲 樊明涛
• 来源期刊: 北方园艺
• 学科: 生物学
• 关键词: 扩展青霉菌 DNA提取 氯化苄法 蜗牛酶法 SDS法 CTAB法 异硫氰酸胍法
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 128-131
• 分类号: Q939.9
• 字数: 4643字
• 语种: 中文

摘要

为寻找一种适合于扩展青霉基因组DNA的提取方法,比较了固体培养、液体静置培养和液体振荡培养3种培养方式的提取效果,分别采用氯化苄法、蜗牛酶法、CTAB法、SDS法及异硫氰酸胍法提取扩展青霉菌基因组DNA,经DNA质量浓度测定及电泳分析,比较5种方法的差异,并利用扩展青霉的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase)基因内一段保守序列,设计PCR引物,扩增大小为288 bp的特异目的基因,检测其灵敏性.结果表明:固体培养的方式较适合扩展青霉基因组DNA的提取,另外5种提取方法均能提取出扩展青霉菌基因组DNA,扩增出目的条带,其中氯化苄法和蜗牛酶法所提DNA的纯度均较好,但蜗牛酶法所提DNA量较少.因此,氯化苄法是5种提取方法中最可靠的DNA提取方法,所提DNA浓度高、纯度好、结果稳定,可作为PCR反应的模板进行特异性扩增,且该方法的最低检测限大约为1.01×10-1μg/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊明涛	西北农林科技大学食品科学与工程学院	163	1536	21.0	27.0
2	何鸿举	西北农林科技大学食品科学与工程学院	6	16	3.0	3.0
3	李亚菲	西北农林科技大学食品科学与工程学院	2	7	2.0	2.0
4	吕茜	西北农林科技大学食品科学与工程学院	2	4	2.0	2.0