一种快速、经济提取外周凝血基因组DNA方法的建立

• 作者: 刘梅 潘晴 王洋阳 王静 许丽娟 马骁
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 凝血基因组DNA 匀浆 KI法 蛋白酶K消化法
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3946-3950
• 分类号: R446|Q75
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种经济、快速且高质量提取人体外周凝血DNA的方法.方法:摸索最佳的匀浆条件,对外周凝血块进行匀浆,采用KI法对匀浆液进行基因组DNA的提取,通过凝胶电泳、单重PCR和多重PCR检测凝血基因组DNA的提取产量和质量,并分别与常规的凝血基因组DNA提取方法,即蛋白酶K消化法,以及提取抗凝血基因组DNA的KI法进行比较分析.结果:最佳的匀浆条件为:39000 rmp,15秒.在此条件下提取的基因组DNA完整性好,纯度和产量与蛋白酶K消化法提取凝血DNA和KI法提取抗凝血DNA的结果相比,没有统计学差异.单重PCR和多重PCR也获得了理想的扩增结果.结论:与常规的外周凝血提取方法相比(蛋白酶K消化法),本方法节省了时间和成本,能快速、经济、有效地提取外周凝血基因组DNA,可用于后续的科研和临床诊断需要,解决了部分科研机构血液基因组DNA的样本来源问题.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王静	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0
2	许丽娟	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
3	马骁	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
4	王洋阳	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0
5	潘晴	江苏省分子医学生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院	1	4	1.0	1.0