蛔虫过敏原ABA-1融合基因在大肠杆菌中的表达及鉴定

• 作者: 于超生 文忠 邹泽红 陈惠芳 陶爱林
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 蛔虫 过敏原 ABA-1 密码子优化 组织构建
• 年，卷（期）: 2011,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3679-3682
• 分类号: R318
• 字数: 4221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2011.20.017

摘要

背景:利用蛔虫基因融合技术,可将过敏原ABA-1的主要基因进行融合.目的:利用大肠杆菌表达系统重组表达蛔虫主要过敏原ABA-1融合蛋白.方法:从Gene Bank和Protein Database中获取蛔虫主要过敏原ABA-1基因和蛋白序列,选定其中的ABA-1B1,ABA-1A2与ABA-1A1基因重组为融合基因BAA,经密码子优化后,全基因合成目的基因BAA并构建于表达载体PET-44a上,经KCM法转化入大肠杆菌JM109中进行克隆,PET-44a/BAA经NdeⅠ和PstⅠ双酶切及DNA测序正确后,转化入大肠杆菌RosettaBlueTM中,经IPTG诱导表达.表达蛋白经Ni柱亲和层析纯化后,通过Western blot和氨基酸测序鉴定目的蛋白.结果与结论:大肠杆菌的融合蛋白BAA表达量约占总蛋白的40%,纯化后蛋其白纯度可达90%左右.Western Blot结果显示在相对分子质量45 000处可见一特异目的条带,氨基酸测序显示N端15个氨基酸与目的蛋白完全相同.结果证实,融合蛋白BAA在大肠杆菌中得到高效的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶爱林	广州医学院第二附属医院过敏反应与临床免疫重点实验室呼吸疾病国家重点实验室	14	84	6.0	9.0
2	邹泽红	广州医学院第二附属医院过敏反应与临床免疫重点实验室呼吸疾病国家重点实验室	19	85	6.0	8.0
3	陈惠芳	广州医学院第二附属医院过敏反应与临床免疫重点实验室呼吸疾病国家重点实验室	3	1	1.0	1.0