GFP示踪FLAG抗原表位标记BMP2转基因腺病毒穿梭质粒的构建

• 作者: 刘丹平 张正 李谌 陈峻江
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 骨形态发生蛋白2 重组腺病毒 质粒 绿色荧光蛋白 抗原表位
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3
• 分类号: Q812
• 字数: 2533字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.10.001

摘要

目的 构建同时表达具有抗原表位FLAG标记的重组人骨形态发生蛋白2(rhBMP2)目的蛋白和示踪绿色荧光蛋白(GFP)报告分子的腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1.方法 采用PCR技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因诱变,去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点XhoⅠ.测序检测诱变情况,将诱变后的BMP2基因定向导入pShuttle CMV-IRES-hrGFP-1,将质粒分别转染人胚肾细胞HEK293A和兔骨髓间充质干细胞(MSCs).通过限制性内切酶酶切图谱分析该质粒;采用荧光显微镜检查和免疫组化SP法测定HEK293A中的GFP和MSCs中的BMP2,行重组腺病毒穿梭质粒鉴定.结果 质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1经双酶切鉴定图谱分析构建正确,HEK293A、MSCs中均有GFP和BMP2表达.结论 pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丹平		61	259	9.0	13.0
2	李谌		22	51	4.0	6.0
3	陈峻江		10	75	3.0	8.0
4	张正		8	9	2.0	2.0